类肾器官分化试剂盒

本公司研发的类肾器官分化试剂盒，可高效将人类多能干细胞（hPSCs）诱导分化为类肾器官。其具有足细胞、肾小管等典型结构，并表达 SYNPO 、WT1 、CDH1 和 LTL 等关键标志物。该试剂盒适用于相关机制研究、毒理学研究、药物筛选等。

注：本产品仅供科学研究使用

1、货号：AKR-C-S-N3DM I-V 、AKR-C-S-N3MI VI-VII 

2、类肾器官分化试剂盒产品说明

类肾器官分化试剂盒使用方法

1.     ESCs 或 iPSCs 细胞培养至 70 %汇合度。

2.     PBS 润洗两次后，加入 Accutase ，于 37 ℃培养箱消化 3-5 min。

3.     加入等体积 mTeSR  中止消化，轻轻吹打以解离为单细胞，收集至 15 mL 离心管中。

4.     1200 RPM 3min 离心，弃去上清，加入 mTeSR+10 uM Rocki 重悬，计数。

5.     Day -2-0  以 1×104/孔将细胞种于超低黏附 96 孔板中，mTsER+Rocki 补至 200 uL/孔体积，培养 2 天。

6.     分化（12 颗类器官）

(1)   Day 0-1 弃去上清，加入 AKR-C-S-N3DM I ，200 uL/孔加入培养板，培养 1 天。

(2)   Day 1-3 弃去上清，加入 AKR-C-S-N3DM II ，200 uL/孔加入培养板，培养 2 天，每天换液。

(3)   Day 4-7 弃去上清，加入 AKR-C-S-N3DM III ，200 uL/孔加入培养板，培养 4 天，每天换液。

(4)   Day 8-10 弃去上清，加入 AKR-C-S-N3DM IV ，200 uL/孔加入培养板，培养 3 天，每天换液。

(5)   Day 11-13 弃去上清，加入 AKR-C-S-N3DM V ，200 uL/孔加入培养板，培养 3 天，每天换液。

(6)   Day 14-15 用灭菌剪刀将 1 mL 枪头尖端剪去，用于吸取肾祖细胞球，将球体以 2-3 个/孔转移至

        6 孔 transwell 上室中。加入 AKR-C-S-N3MI VI ，1.5 mL/孔加入 Transwell 下室，培养 2 天，每天换液。 

(7)   Day 16-25 弃去上清，加入 AKR-C-S-N3MI VII ，1.5 mL/孔加入 Transwell 下室，培养至第 25 天以形成肾类器官，每天换液。

注意：上述实验过程仅供参考，实际操作时应根据细胞系、环境等具体情况进行调整。染色、组化等下游检测的结果，除受诱导效果影响外，更依赖于细胞系自身特性、抗体灵敏度与特异性、 以及检测方案的优化程度等因素。我司无法对下游检测的结果提供保证，亦不负责处理因此类问题引发的争议。